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UV1800PC紫外可見分光光度計法檢測亞硝酸鹽

萘乙二胺分光光度法 

分光光度計簡介

紫外分光光度法其比較重要的用途是用于有機(jī)化合物的定性和定量分析方面。因為很多有機(jī)化合物及其衍生物在紫外波段有強的吸收光譜，可以把未知試樣的紫外吸收光譜圖和標(biāo)準(zhǔn)試樣(或與標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)圖譜)比較，當(dāng)濃度和溶劑相同時，若兩者的譜圖相同（峰、極小值和拐點的λ相同），而且未知樣品大體已知時，可以說明它們是同一個化合物。但是在紫外和可見光區(qū)域，這些特征的峰、極小值和拐點的數(shù)目往往是有限的，且紫外吸收光譜的吸收峰還較寬，兩種不同的化合物可能有相同的紫外吸收光譜，對于*未知的有機(jī)化合物，有時可以通過改換溶劑和適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)處理之后所得的未知標(biāo)準(zhǔn)光譜對照，不僅比較λ，還要比較它們的λmax和A，來進(jìn)一步確證，甚至還要進(jìn)一步借助紅外、核磁和質(zhì)譜等手段才能zui后得出結(jié)論。    紫外分光光度法進(jìn)行定量分析是有快速，靈敏度高及分析混合物中各組份有時不需要事前分離，不需要顯色劑，因而不受顯色劑溫度及顯色時間等因素的影響，操作簡便等優(yōu)點。目前廣泛用于微量或痕量分析中。但有一個局限性，就是待測試樣必須在紫外區(qū)有吸收并且在測試濃度范圍服從比耳定律才行。    利用紫外光度法測定試樣中單組份含量時，通常先測定物質(zhì)的吸收光譜，然后選擇zui大吸收峰的波長進(jìn)行測定。其原理與一般比色分析相同?？捎脴?biāo)準(zhǔn)工作曲線法。如果通過實驗證明，在測定條件下符合比耳定律，也可以不用標(biāo)準(zhǔn)曲線而與標(biāo)準(zhǔn)品的已知濃度溶液比較求出未知樣品濃度。

紫外可見分光光度計檢測亞硝酸鹽的原理

紫外分光光度計法的使用基于朗伯-比耳定律。朗伯-比耳定律(Lambert－Beer)是光吸收的基本定律，俗稱光吸收定律，是分光光度法定量分析的依據(jù)和基礎(chǔ)。當(dāng)入射光波長一定時，溶液的吸光度A是吸光物質(zhì)的濃度C及吸收介質(zhì)厚度l(吸收光程)的函數(shù)。

物質(zhì)的吸收光譜本質(zhì)上就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量，相應(yīng)地發(fā)生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結(jié)果。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu)，其吸收光能量的情況也就不會相同。因此，每種物質(zhì)就有其*的、固定的吸收光譜曲線，可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質(zhì)的含量，這就是分光光度定性和定量分析的基礎(chǔ)。分光光度分析就是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。又因為許多物質(zhì)在紫外-可見光區(qū)有特征吸收峰，所以可用紫外分光光度法對這些物質(zhì)分別進(jìn)行測定（定量分析和定性分析）。    

 在酸性介質(zhì)中亞硝酸鹽與磺胺進(jìn)行重氮化反應(yīng)，其產(chǎn)物再與鹽酸萘乙二胺偶合生成紅色偶氮染料，于543 nm波長測定吸光值。 

 注意事項：大量的硫化氫干擾測定，可在加入磺胺后用氮氣驅(qū)除硫化氫。

試劑： 除非另作說明，所用試劑均為分析純，水為無亞硝酸鹽的二次蒸餾水或等效純水。 磺胺溶液：10 g/L  稱取5 g碘胺(NH2SO2C6H4NH2)，溶于350 mL鹽酸溶液(1+6)，用水稀釋至500 mL，盛于棕色試劑瓶中，有效期為2個月。 38.1.3.2  鹽酸萘乙二胺溶液：1 g/L 稱取0.5 g鹽酸萘乙二胺(C10H7NHCH2CH2NH2·2HCl)，溶于500 mL水中，盛于棕色試劑瓶中于冰箱內(nèi)保存，有效期為1個月。

 亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)溶液： 

 亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液：100 μg/mL-N 

    稱取0.492 6 g亞硝酸鈉(NaNO2)經(jīng)110℃下烘干，溶于少量水中后全量轉(zhuǎn)移入1 000 mL量瓶中，加水至標(biāo)線，混勻。加1 mL三氯甲wan(CHCl3)，混勻。貯于棕色試劑瓶中于冰箱內(nèi)保存，有效期為兩個月。 

亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)使用溶液：5.0 μg/mL-N 移取5.00 mL亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液(38.1.3.3.1)于100 mL量瓶中，加水至標(biāo)線，混勻。臨用前配制。

  儀器及設(shè)備 

    ——分光光度計(723nPC/723SPC/UV1700PC/uv1800pc)；     

——量瓶：100，1 000 mL各1個；     

——量筒：50，500 mL各1個； 

    ——具塞比色管：50 mL(帶刻度)，30個；  

   ——燒杯：100，500 mL，各1個； 

    ——試劑瓶：棕色500 mL，2個，1 000 mL，1個； 

    ——聚乙烯洗瓶：500 mL，1個；  

   ——自動移液管：1 mL，2支；    

 ——刻度吸管：1，5 mL，各1支； 

    ——吸氣球：1只； 

    ——玻璃棒：直徑5 mm，長15 cm，2支；    

 ——一般實驗室常備儀器和設(shè)備。 38.1.5  分析步驟 

繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線 

 取6個50 mL具塞比色管，分別加入0，0.10，0.20，0.30，0.40，0.50 mL亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)使用溶液(38.1.3.3.2)加水至標(biāo)線，混勻。標(biāo)準(zhǔn)系列各點的濃度分別為0，0.010，

 0.020，0.030，0.040，0.050 mg/L。 

  各加入1.0 mL磺胺溶液(38.1.3.1)，混勻。放置5 min。 

 各加入1.0 mL鹽酸萘乙二胺溶液(38.1.3.2)混勻。放置15 min。 

  選543 nm波長，5 cm測定池，以水作參比，測其吸光值Ai。其中零濃度為標(biāo)準(zhǔn)空白吸光值A0。 

 以吸光值(Ai-A0)為縱坐標(biāo)，濃度(mg/L)為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 38.1.5.2  水樣的測定 

  移取50.0 mL已過濾的水樣于具塞比色管中。 

 參照(38.1.5.1.2～38.1.5.1.4)步驟測量水樣的吸光值Aw。 38.1.5.2.3  量取50.0 mL二次去離子水，于具塞比色管中，參照上述38.1.5.1.2～38.1.5.1.4步驟測量分析空白吸光值 記錄與計算 

    將測得數(shù)據(jù)記錄于分析記錄附錄表A2及表A1中，按式(68)計算An。 

An=Aw—Ab    ……………………… (68) 

    由An值查工作曲線或按式(69)計算水樣中亞硝酸鹽氮的濃度。 

ρNO2—N=baAn  ……………………… (69) 式中：ρNO2—N——水樣中亞硝酸鹽氮的濃度，mg/L；              An——水樣中亞硝酸鹽氮的吸光值；               a——標(biāo)準(zhǔn)曲線中的截距；           b——標(biāo)準(zhǔn)曲線中的斜率。 38.1.7  精密度和準(zhǔn)確度 38.1.8  注意事項 

 水樣加鹽酸萘乙二胺溶液后，須在2 h內(nèi)測量完畢，并避免陽光照射。 38.1.8.2  溫度對測定的影響不顯著，但以10～25 ℃內(nèi)測定為宜。 38.1.8.3  標(biāo)準(zhǔn)曲線每隔一周須重制一次，當(dāng)測定樣品的實驗條件與制定工作曲線的條件相差較大時，如更換光源或光電管、溫度變化較大時，須及時重制標(biāo)準(zhǔn)曲線。